Kate Beckinsale als Vampir-Kriegerin: Inmitten des Kriegs zwischen Vampiren und Werwölfen sind Selene und Michael auf der Flucht vor ihren Familien. Doch dann erfahren sie vom mächtigen Vampir Marcus, der seinen Werwolf-Bruder William aus ewiger Gefangenschaft befreien will, um Chaos und Zerstörung über die Welt zu bringen. Nur Selene und Michael können dies verhindern — aber sie müssen sich beeilen, das Rätsel ihrer eigenen Vergangenheit zu lösen, bevor es zu spät ist. Auf ihrem blutigen Rachefeldzug hat Vampirin Selene (Kate Beckinsale) ihren einstigen Ziehvater, den Vampirfürsten Viktor (Bill Nighy), getötet und ist nun ihres Lebens nicht mehr sicher. Als einziger Verbündeter bleibt ihr Werwolf-Vampir-Mischling Michael. Die beiden müssen vor Vampirkönig Marcus und seinen Schergen flüchten. Dieser sucht nach dem Ur-Werwolf William, den Viktor seit Jahrhunderten in einer Gruft gefangen hielt. Gemeinsam mit ihm will Marcus über eine neue Rasse von Hybrid-Wesen herrschen. Doch nur Selene kennt den Standort des Sarkophags und besitzt einen Teil des Schlüssels. In ihrer Not wenden sich Michael und Selene an den Urvater aller Unsterblichen, Marcus Vater Alexander. Nur er kennt die Ursachen für den ewigen Kampf zwischen Vampiren und Werwölfen ...